生物化學與分子生物學實驗教程（第2版）

第一篇 生物化學與分子生物學實驗基本知識與理論
第一章 生物化學與分子生物學實驗基本知識
一、實驗室基本規(guī)則
二、實驗室基本操作
三、實驗樣品的制備
四、實驗誤差與數(shù)據(jù)處理
五、實驗記錄與實驗報告
第二章 生物化學實驗基本技術(shù)理論
一、分光光度技術(shù)
二、層析技術(shù)
三、電泳技術(shù)
四、離心技術(shù)
第三章 分子生物學實驗基本技術(shù)理論
一、重組DNA技術(shù)
二、核酸分子雜交技術(shù)
三、聚合酶鏈反應技術(shù)
四、蛋白質(zhì)印跡技術(shù)
第四章 生物化學與分子生物學專業(yè)常用數(shù)據(jù)庫及其應用
一、常用數(shù)據(jù)庫
二、常用分析工具
三、真核基因啟動子區(qū)生物信息學分析
四、microRNA靶標的預測
第二篇 生物化學與分子生物學實驗操作
第五章 生物化學實驗操作
實驗1 蛋白質(zhì)的兩性反應與等電點測定
實驗2 蛋白質(zhì)的沉淀反應
實驗3 蛋白質(zhì)的熱變性
實驗4 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量
實驗5 Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量
實驗6 考馬斯亮藍染色法測定蛋白質(zhì)含量
實驗7 紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量
實驗8 BCA法測定蛋白質(zhì)含量
實驗9 凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量
實驗10 乙酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白
實驗11 SDS-PAGE蛋白電泳
實驗12 蛋白質(zhì)雙向電泳
實驗13 單向上行紙層析分離氨基酸
實驗14 轉(zhuǎn)氨基作用與氨基酸的紙層析
實驗15 凝膠柱層析分離蛋白質(zhì)
實驗16 動物肝臟DNA的分離提取、鑒定及含量測定
實驗17 動物組織RNA的分離提取、鑒定及含量測定
實驗18 溫度對酶活性的影響
實驗19 酸堿度對酶活性的影響
實驗20 抑制劑和激活劑對酶活性的影響
實驗21 尿淀粉酶活性的測定
實驗22 酶反應速度與米氏常數(shù)測定
實驗23 血糖（葡萄糖）的測定
實驗24 血清甘油三酯的測定
實驗25 血清膽固醇的測定
實驗26 血清高密度脂蛋白膽固醇及其亞組分測定
實驗27 血清尿素氮含量測定（改良二乙酰一肟法）
實驗28 血液和尿中肌酐含量測定
第六章 分子生物學實驗操作
實驗29 質(zhì)粒DNA的提取
實驗30 質(zhì)粒DNA的酶切及電泳
實驗31 DNA片段的回收
實驗32 DNA片段的連接
實驗33 感受態(tài)細菌的制備
實驗34 重組DNA的轉(zhuǎn)化與篩選
實驗35 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達
實驗36 常規(guī)PCR
實驗37 逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應
實驗38 實時定量PCR
實驗39 DNA的分子雜交——Southem印跡
實驗40 RNA的分子雜交——Northem印跡
實驗41 蛋白質(zhì)的免疫印跡——Western印跡
實驗42 cDNA文庫的構(gòu)建
實驗43 熒光素酶報告基因檢測啟動子活性
實驗44 電泳遷移阻滯實驗
實驗45 染色質(zhì)免疫沉淀實驗
實驗46 酵母雙雜交實驗
實驗47 RNA干擾實驗
實驗48 蛋白質(zhì)免疫共沉淀實驗
實驗49 RNA免疫共沉淀實驗
實驗50 GST pull-down實驗
附錄
附錄1 化學試劑分級與注意事項
附錄2 常用緩沖液的配制
附錄3 硫酸銨飽和度計算表
附錄4 常用培養(yǎng)基及抗生素的配制
附錄5 離心機轉(zhuǎn)速（r／min）與相對離心力（RCF）的換算