分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

第一部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)1
實(shí)驗(yàn)1質(zhì)粒的提取1
（Ⅰ）堿法1
（Ⅱ）硅石粉法4
實(shí)驗(yàn)2質(zhì)粒DNA瓊脂糖凝膠電泳7
實(shí)驗(yàn)3質(zhì)粒DNA酶切檢查10
實(shí)驗(yàn)4DNA片段的回收12
(Ⅰ)低熔點(diǎn)瓊脂糖法12
(Ⅱ)玻璃奶法14
實(shí)驗(yàn)5DNA片段的體外連接16
實(shí)驗(yàn)6大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備和轉(zhuǎn)化18
實(shí)驗(yàn)7陽性克隆的篩選及鑒定21
實(shí)驗(yàn)8噬菌體的空斑純化23
實(shí)驗(yàn)9噬菌體的制備及效價(jià)測定25
實(shí)驗(yàn)10λ噬菌體DNA的小量制備28
實(shí)驗(yàn)11M13噬菌體DNA的制備30
實(shí)驗(yàn)12哺乳動(dòng)物基因組DNA的制備33
實(shí)驗(yàn)13植物DNA的制備36
實(shí)驗(yàn)14細(xì)菌基因組DNA的制備38
實(shí)驗(yàn)15基因組DNA的電泳分析40
實(shí)驗(yàn)16PCR擴(kuò)增DNA中的引物設(shè)計(jì)(Ⅰ)42
PCR擴(kuò)增DNA中的引物設(shè)計(jì)(Ⅱ)46
實(shí)驗(yàn)17PCR擴(kuò)增DNA的基本反應(yīng)50
實(shí)驗(yàn)18動(dòng)物細(xì)胞總RNA的快速提取53
實(shí)驗(yàn)19植物細(xì)胞總RNA的提取56
實(shí)驗(yàn)20細(xì)菌總RNA的提取59
實(shí)驗(yàn)21總RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳檢測62
實(shí)驗(yàn)22探針的制備65
實(shí)驗(yàn)23Southern雜交68
實(shí)驗(yàn)24Northern雜交72
實(shí)驗(yàn)25Western吸印76
第二部分綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)80
實(shí)驗(yàn)1克隆并鑒定一個(gè)真核單拷貝基因80
實(shí)驗(yàn)2溶藻弧菌外膜蛋白基因OmpU的克隆與原核表達(dá)81
第三部分研究性實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用91
實(shí)驗(yàn)1DNA導(dǎo)入細(xì)胞技術(shù)91
實(shí)驗(yàn)2DNA的體外轉(zhuǎn)錄99
實(shí)驗(yàn)3DNA的體外翻譯103
實(shí)驗(yàn)4DNA的定點(diǎn)突變106
實(shí)驗(yàn)5DNA的轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)確定110
實(shí)驗(yàn)6具啟動(dòng)子活性的DNA序列確定113
實(shí)驗(yàn)7啟動(dòng)子與調(diào)控蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)118
實(shí)驗(yàn)8甲基化干擾和足跡實(shí)驗(yàn)122
實(shí)驗(yàn)9RNA的酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)127
實(shí)驗(yàn)10mRNA代表性差異展示技術(shù)131
實(shí)驗(yàn)11oligo(dT)纖維素色譜法提取poly(A)+RNA134
實(shí)驗(yàn)12基因表達(dá)序列分析136
實(shí)驗(yàn)13DNA改組技術(shù)144
實(shí)驗(yàn)14蛋白質(zhì)糖基化及磷酸化研究148
實(shí)驗(yàn)15免疫共沉淀153
實(shí)驗(yàn)16GST pulldown技術(shù)研究蛋白質(zhì)互相作用156
實(shí)驗(yàn)17酵母雙雜交系統(tǒng)釣取與某一蛋白互相作用的蛋白159
實(shí)驗(yàn)18RNA干擾研究蛋白質(zhì)功能167
實(shí)驗(yàn)19染色質(zhì)共沉淀技術(shù)171
實(shí)驗(yàn)20基因敲除實(shí)驗(yàn)175
實(shí)驗(yàn)21基因敲低實(shí)驗(yàn)177
第四部分考研例題及?？嫉姆肿由飳W(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)179
參考文獻(xiàn)180