生物文庫技術(shù)：噬菌體展示與SELEX技術(shù)

定　價：￥28.00

作　者：	邵寧生，楊光，房濤主編
出版社：	軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社
叢編項：
標(biāo)　簽：	微生物學(xué)

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ISBN：	9787802450691	出版時間：	2011-10-01	包裝：	平裝
開本：	16開	頁數(shù)：	144	字?jǐn)?shù)：

內(nèi)容簡介

　　噬菌體展示技術(shù)和SELEX技術(shù)是生物文庫技術(shù)中最常用的兩種技術(shù)。噬菌體展示技術(shù)是將外源蛋白的基因型與表型聯(lián)系在一起，通過篩選可以將展示特異性外源蛋白多肽的噬菌體從表達有各種外源蛋白的噬菌體庫中篩選出來，經(jīng)擴增可以得到上千倍乃至108倍的富集。獲得的靶（分）子特異結(jié)合肽在拮抗肽篩選、抗體抗原表位鑒定方面十分有用。SELEX技術(shù)是應(yīng)用大容量的人工合成隨機寡核苷酸庫，結(jié)合PCR體外擴增技術(shù)，以指數(shù)級富集與靶（分）子特異結(jié)合的寡核苷酸適配體（aptamer）的方法。由于獲得的aptamer具有高特異性、高親和力，在特異分子標(biāo)志物篩選及靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)方面具有獨到優(yōu)勢。目前，噬菌體展示和SELEX技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、藥物篩選、疫苗及診斷試劑的研制等方面，具有很好的應(yīng)用前景?！渡镂膸旒夹g(shù)：噬菌體展示與SELEX技術(shù)》作者經(jīng)過多年努力，建立和改良了多種噬菌體展示和SELEX技術(shù)平臺，并利用上述技術(shù)平臺開展了針對感染、炎癥、腫瘤和生物毒素等方面的新型診斷或治療藥物以及基礎(chǔ)方面的研究，取得了良好的結(jié)果。此書是根據(jù)作者實際工作經(jīng)驗，結(jié)合具體篩選實例編寫而成，特別編入作者的經(jīng)驗借鑒與注意事項，為讀者提供了較詳盡的參考技術(shù)路線和具體操作方法，盡量使具有一定生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗基礎(chǔ)的科技人員能夠快速掌握噬茵體展示和SELEX技術(shù)。

作者簡介

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圖書目錄

上篇噬菌體表面展示技術(shù)原理及其操作指南
　第1章概述
　一、噬菌體表面展示隨機肽庫
　二、噬菌體抗體庫
　三、噬菌體表面展示技術(shù)篩選原理和基本方法
　四、噬菌體表面展示技術(shù)的應(yīng)用
　第2章噬菌體表面展示肽庫技術(shù)操作指南
　一、試劑
　二、實驗步驟
　三、影響篩選的因素
　四、結(jié)果判斷和分析
　第3章噬菌體肽庫構(gòu)建及篩選實例
　實例1 基于昆蟲防御素A蛋白分子的噬菌體展示構(gòu)象肽庫的構(gòu)建
　實例2 重組hTNF-α結(jié)合肽的篩選
　實例3 馬抗SARS-CoV多抗抗原表位的篩選
　第4章噬菌體抗體庫技術(shù)操作指南
　一、試劑
　二、實驗步驟
　三、影響篩選的因素
　第5章噬菌體抗體庫構(gòu)建及篩選實例
　一、引物
　二、淋巴細胞總RNA的提取及VH和VL基因的擴增
　三、初級噬菌體抗體庫的構(gòu)建
　四、通過Cre-loxP位點特異性重組構(gòu)建大容量噬菌體抗體庫
　五、噬菌體抗體庫的篩選
　六、噬菌體抗體的鑒定及序列分析
下篇 SELEX技術(shù)原理及其操作指南
　第1章概述
　一、SELEX技術(shù)的基本技術(shù)路線
　二、SELEX篩選的特點
　三、SELEX的應(yīng)用
　四、適配子的改造
　第2章 SELEX技術(shù)操作指南
　一、試劑與設(shè)備
　二、文庫/文庫模板和引物的設(shè)計與合成
　三、RNA文庫的獲得（PCR、體外轉(zhuǎn)錄與RNA回收）
　四、文庫與靶分子孵育
　五、結(jié)合寡核苷酸分子的分離
　六、反轉(zhuǎn)錄
　七、PCR
　八、下一輪篩選用文庫的制備
　九、重復(fù)篩選
　十、篩選后獲得的特異aptamer的分析
　第3章 SELEX技術(shù)篩選實例
　實例1 牛凝血酶特異的RNA aptamer的篩選
　實例2 CE-SELEX篩選技術(shù)
　實例3 親和層析SELEX篩選促紅細胞生成素適配體及基于分子信標(biāo)檢測方法的建立
　實例4 親和層析SELEX篩選相思子毒素適配體及其在分析檢測中的應(yīng)用
　實例5 以完整細胞為靶的消減SELEX篩選
　實例6 腫瘤組織切片-SELEX技術(shù)篩選臨床標(biāo)本分子探針
　實例7 組合aptamer用于金黃色葡萄球菌檢測的研究