醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

第一章  緒論
　第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)教學(xué)的目的和要求
　第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫
　第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)室守則
第二章  醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)及原理
　第一節(jié) 生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器與基本操作
　　一、常用儀器設(shè)備
　　二、基本操作
　　三、實(shí)驗(yàn)樣品的制備
　第二節(jié) 生物化學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法及基本原理
　　一、分光光度法
　　二、層析法
　　三、電泳法
　　四、離心分離技術(shù)
　第三節(jié) 分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法及基本原理
　　一、PCR技術(shù)
　　二、印跡技術(shù)
　　三、核酸分子雜交技術(shù)
　　四、重組DNA技術(shù)
　第四節(jié) 細(xì)胞生物學(xué)與遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器和基本操作
　　一、顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用
　　二、細(xì)胞培養(yǎng)必需設(shè)備和無菌操作技術(shù)
　第五節(jié) 細(xì)胞生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法及基本原理
　　一、細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察方法
　　二、細(xì)胞組分的分析方法
　　三、流式細(xì)胞分析技術(shù)
　　四、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
　第六節(jié) 醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法及基本原理
　　一、染色體的制備與分析技術(shù)
　　二、人類遺傳病的分子生物學(xué)診斷方法
第三章  細(xì)胞和亞細(xì)胞組分分析實(shí)驗(yàn)方法
　第一節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法
　　一、細(xì)胞的原代培養(yǎng)
　　實(shí)驗(yàn)1 雞胚成纖維細(xì)胞的原代細(xì)胞培養(yǎng)
　　實(shí)驗(yàn)2 大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)
　　二、細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
　　實(shí)驗(yàn)1 貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
　　實(shí)驗(yàn)2 懸浮細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
　　三、培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)1 體外培養(yǎng)細(xì)胞的計(jì)數(shù)與死、活細(xì)胞鑒別
　　實(shí)驗(yàn)2 MTT比色法
　　實(shí)驗(yàn)3 化學(xué)物質(zhì)對(duì)細(xì)胞的作用
　第二節(jié) 細(xì)胞和亞細(xì)胞組分分析的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法
　　一、細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞分裂的觀察
　　實(shí)驗(yàn)1 細(xì)胞標(biāo)本的制備與形態(tài)觀察
　　實(shí)驗(yàn)2 細(xì)胞無絲分裂和有絲分裂
　　二、亞細(xì)胞組分的分離及觀察鑒定方法
　　實(shí)驗(yàn) 亞細(xì)胞組分的分離及觀察鑒定
第四章  生物分子分析實(shí)驗(yàn)方法
　第一節(jié) 生物分子在細(xì)胞內(nèi)定位與分布的分析方法
　　一、核酸在細(xì)胞內(nèi)的分布
　　實(shí)驗(yàn) DNA特異顯示法定性分析核酸在細(xì)胞內(nèi)的分布
　　二、酶和蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位
　　實(shí)驗(yàn)1 乳酸脫氫酶在細(xì)胞內(nèi)定位的分析
　　實(shí)驗(yàn)2 堿性和酸性蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)定位的分析
　　三、糖和脂類在細(xì)胞內(nèi)的分布
　　實(shí)驗(yàn)1 過碘酸希夫反應(yīng)定性分析糖原在細(xì)胞內(nèi)的分布
　　實(shí)驗(yàn)2 蘇丹黑染色法定性分析脂類在細(xì)胞內(nèi)的分布
　第二節(jié) 蛋白質(zhì)的分析實(shí)驗(yàn)方法
　　一、蛋白質(zhì)性質(zhì)的分析
　　實(shí)驗(yàn)1 蛋白質(zhì)的兩性解離性和等電點(diǎn)測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)2 蛋白質(zhì)的變性和沉淀反應(yīng)
　　二、蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)1 蛋白質(zhì)含量的Folin-酚法測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)2 紫外光吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度
　　三、蛋白質(zhì)和氨基酸的分離、提取、純化和鑒定
　　實(shí)驗(yàn)1 離子交換柱層析法分離混合氨基酸
　　實(shí)驗(yàn)2 醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì)
　　實(shí)驗(yàn)3 血清r-球蛋白的初步分離提取
　　實(shí)驗(yàn)4 血清r-球蛋白的精細(xì)分離與純度鑒定
　第三節(jié) 酶的分析實(shí)驗(yàn)方法
　　一、酶反應(yīng)條件的選擇
　　實(shí)驗(yàn)酶促反應(yīng)的影響因素
　　二、酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究
　　實(shí)驗(yàn)堿性磷酸酶的Km值測(cè)定
　　三、酶的分離提取及活性測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)堿性磷酸酶的分離提取和比活性測(cè)定
　第四節(jié) 糖類和脂類分析實(shí)驗(yàn)方法
　　一、糖類分離、提取和鑒定
　　實(shí)驗(yàn)茯苓多糖和豬苓多糖的水解與鑒定
　　二、脂類分離、提取和鑒定
　　實(shí)驗(yàn)脂質(zhì)的薄層層析
第五章  分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法
　第一節(jié) DNA的制備與分析方法
　　一、DNA的制備
　　實(shí)驗(yàn)1 組織DNA的分離、提取和純化
　　實(shí)驗(yàn)2 血細(xì)胞DNA的快速分離提取
　　二、DNA的分析
　　實(shí)驗(yàn)1 瓊脂糖凝膠電泳法分離DNA片段
　　實(shí)驗(yàn)2 核酸分子探針標(biāo)記與雜交實(shí)驗(yàn)
　第二節(jié) 基因表達(dá)分析方法
　　一、RNA的制備
　　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織總RNA的提取和純化
　　二、基因表達(dá)的分析方法
　　實(shí)驗(yàn)1 RT—PCR法檢測(cè)基因的表達(dá)
　　實(shí)驗(yàn)2 蛋白質(zhì)印跡法
　第三節(jié) 基因工程技術(shù)
　　一、載體DNA的制備與鑒定
　　實(shí)驗(yàn)質(zhì)粒DNA的快速分離提取和酶切與鑒定
　　二、體外DNA擴(kuò)增技術(shù)
　　實(shí)驗(yàn)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增基因組DNA
　　三、目的基因的分離與鑒定
　　實(shí)驗(yàn)小鼠肝臟細(xì)胞β-actin基因片段的分離提取、擴(kuò)增與鑒定
　　四、重組DNA分子的構(gòu)建、導(dǎo)入和篩選
　　實(shí)驗(yàn)1 目的基因的純化與回收和重組DNA的構(gòu)建
　　實(shí)驗(yàn)2 重組DNA的導(dǎo)入和篩選
第六章  生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
　第一節(jié) 臨床疾病與生物化學(xué)特定物質(zhì)的測(cè)定
　　一、高脂血癥與血清脂類分析測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)血清甘油三酯、總膽固醇和HDL一膽固醇的測(cè)定
　　二、糖尿病與血糖濃度分析測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)血糖濃度的定量測(cè)定
　　三、肝臟疾病與血清酶活性的分析測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)血清谷一丙轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定
　　四、腎功能異常與血清尿素氮的分析測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)血清尿素氮含量的測(cè)定
　第二節(jié) 人類遺傳疾病與染色體核型和系譜分析
　　一、染色體的制備與觀察
　　實(shí)驗(yàn)1 小鼠骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備與觀察
　　實(shí)驗(yàn)2 人體外周淋巴細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本的制備
　　實(shí)驗(yàn)3 人類染色體顯帶技術(shù)
　　二、染色體的核型分析
　　實(shí)驗(yàn)正常人染色體核型分析及人類異常染色體的識(shí)別
　　三、系譜的繪制和分析
　　實(shí)驗(yàn)系譜分析
　　四、人類遺傳病的分型及特點(diǎn)
　　實(shí)驗(yàn) 人類遺傳病的分型及特點(diǎn)
　第三節(jié) 生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)在腫瘤研究中的應(yīng)用
　　一、腫瘤細(xì)胞的集落培養(yǎng)與細(xì)胞中物質(zhì)的測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤細(xì)胞集落形成率和細(xì)胞中總蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
　　二、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)在癌癥研究中的應(yīng)用
　　實(shí)驗(yàn)PCR—SSCP技術(shù)在癌基因篩查中的應(yīng)用
參考文獻(xiàn)
附錄